Aislamiento de ácidos nucleicos para el diagnóstico veterinario
Los veterinarios utilizan una variedad de herramientas para diagnosticar enfermedades, controlar la progresión de la enfermedad o la respuesta a la terapia, y examinar a animales aparentemente sanos para detectar la presencia de enfermedades subyacentes. Muchos de estos métodos se basan en técnicas de detección de biología molecular como qPCR o secuenciación. MACHEREY-NAGEL ha desarrollado, por lo tanto, productos específicos para la extracción de ácidos nucleicos patógenos como ARN/ADN viral o ADN bacteriano. Estos kits de extracción de ADN/ARN son adecuados para prácticamente todas las muestras veterinarias, proporcionan ácidos nucleicos de alta calidad con excelente pureza, y están disponibles en formatos manuales o automatización:
NucleoSpin VET - extracción de muestras basada en membrana de sílice
El NucleoSpin VET es un kit de membrana de sílice de un solo centrifugado para el aislamiento de ARN/ADN viral y ADN de bacterias de diversos especímenes de muestras veterinarias, como suero, plasma, fluidos biológicos libres de células, sangre entera de animales, tejido, hisopos, leche y heces. La versátil gama de aplicaciones aporta máxima flexibilidad a su rutina diaria de laboratorio automatización y permite el procesamiento de una amplia variedad de materiales de muestra utilizando el mismo protocolo estándar después de la preparación de muestras.
- Extracción de ARN/ADN viral y ADN de bacterias libre de inhibidores
- Máxima flexibilidad para varios tipos de muestras veterinarias
- Mismo protocolo estándar para todas las matrices de especímenes después de la preparación de muestras
- Protocolo de vía rápida de 20 minutos para pruebas de rutina rápidas de matrices de muestras de baja complejidad
Reliable viral DNA and RNA recovery with NucleoSpin VET kit from bovine blood
The NucleoSpin VET kit was used for viral DNA and RNA isolation from bovine EDTA blood with diverse virus load. The thawed bovine blood was spiked with LSDV (lumpy skin disease virus; DNA virus), BoCoV and FMDV (bovine corona virus, foot-and-mouth-disease virus; RNA viruses) at various dilution levels. The samples were purified using the NucleoSpin VET kit following the standard protocol procedure and eluates were subsequently analyzed via RT-qPCR using AgPath-IDTM One-Step RT-PCR reagents (ThermoFisher Scientific). The NucleoSpin VET kit shows consistent and reliable viral RNA and DNA recovery from high to low viral titer samples (FMDV titer in 1:10000 dilution was below detection limit). Source: Product Broschure NucleoSpin VET; data kindly provided by Hanna Keck and Michael Eschbaumer, Friedrich-Loeffler-Institut, Federal Research Institute for Animal Health of Germany.
RT-qPCR detection of foot-and-mouth disease virus in bovine milk and skin lesions
To compare manual and automated extraction, the NucleoSpin VET kit and the NucleoMag VET kit were used to isolate viral RNA from known FMDV-positive samples (foot-and-mouth-disease virus). The samples were purified using the NucleoSpin VET kit following the standard protocol procedure and in parallel with the magnetic bead based NucleoMag® VET kit (100 µL sample input). Eluates were subsequently analyzed via RT-qPCR using AgPath-IDTM OneStep RT-PCR reagents (ThermoFisher Scientific). The results show that both kits performed comparably well, even with difficult samples such as very fatty milk or skin lesions. Source: Product Broschure NucleoSpin VET; data kindly provided by Hanna Keck and Michael Eschbaumer, Friedrich-Loeffler-Institut, Federal Research Institute for Animal Health of Germany.
NucleoMag VET - extracción de muestras basada en partículas magnéticas
El NucleoMag VET es un kit basado en partículas magnéticas para la extracción manual o automatización de ARN/ADN viral y ADN bacteriano de muestras veterinarias como suero, plasma, fluidos biológicos libres de células, sangre entera animal, tejido, hisopos, leche y heces. Después del tratamiento de la muestra, las muestras pueden procesarse con el protocolo de purificación estándar.
- Extracción de ARN/ADN viral e ADN bacteriano libre de inhibidores
- Máxima flexibilidad para diversos tipos de muestras veterinarias
- Mismo protocolo estándar para todas las matrices de muestras después de la preparación de muestras
- Fácil de automatización en sistemas de varillas magnéticas o manipuladores líquidos - Contact us para asistencia
Detección fiable de BTV, CSFV, PCV 2 y SBV tras el aislamiento de ADN o ARN utilizando el kit NucleoMag VET
El kit NucleoMag VET se utilizó para extraer ácidos nucleicos virales de sangre bovina (A), sangre porcina (B), tejido porcino (c) o suero bovino (d). Posteriormente, se realizó un análisis de qPCR para determinar la carga de títulos virales en los materiales de muestra: (A) BTV (virus de la lengua azul); (B) CSFV (virus de la fiebre clásica porcina) (C) PCV 2 (circovirus porcino tipo 2); (D) SBV (virus de Schmallenberg). Se comparó el rendimiento de la extracción con otros kits comerciales de extracción de ácidos nucleicos disponibles para el aislamiento de ARN y/o ADN viral. Los datos de qRT-PCR muestran que la concentración de ADN o ARN varía según el kit de extracción utilizado, lo que resulta en una detección disímil de BTV, CSFV, PCV 2 y SBV. Para la detección de los diversos virus en los diferentes materiales de muestra, se demuestra que la concentración de ADN o ARN fue siempre alta utilizando el NucleoMag VET en comparación con los otros kits. Los valores de Ct obtenidos para los ácidos nucleicos virales y los materiales de muestra muestran que el kit NucleoMag VET es un kit de extracción muy consistente y fiable, obteniendo valores de Ct bajos para una detección fiable de virus independientemente del tipo de virus o del material de muestra. Fuente: Nota de aplicación NucleoMag VET en KingFisher; los datos fueron amablemente proporcionados por el Dr. Hoffmann, Friedrich-Loeffler-Institut, Alemania.
Se puede encontrar más información sobre los datos de aplicación para el kit NucleoMag VET a través de las referencias científicas en la lista de bibliografía o en las notas de aplicación a continuación!
Citado en más de 100 publicaciones revisadas por pares!
El NucleoMag VET ha sido citado en más de 100 publicaciones revisadas por pares. El kit, basado en partículas magnéticas, se ha utilizado en investigación y diagnóstico molecular para una variedad de patógenos relevantes para la medicina veterinaria. Haga clic aquí para ver la lista de referencias completa:
- Virus de la fiebre porcina africana/clásica
- Virus de la enfermedad de la piel linfoedematosa
- Virus de los pequeños rumiantes
- Virus de la influenza A
- Virus de la fiebre aftosa
- Virus de Schmallenberg
¡Extracción automatizada de muestras, fácil!
¿Está planeando automatizar su preparación de muestras? Los especialistas en automatización de MACHEREY-NAGEL pueden apoyarle en la implementación del kit NucleoMag VET en su plataforma robótica. Contáctenos para obtener apoyo o scripts gratuitos y listos para usar, p. ej. para instrumentos KingFisher u otras plataformas de manipuladores líquidos y varillas magnéticas:
Correo electrónico: bio-tech@mn-net.com I Tel.: +49 24 21 969 270