Aislamiento a escala preparativa de ADN plasmídico de grado vacunal
NucleoBond RS – para altos estándares regulatorios
Sistema modular para la purificación de plásmidos de alta calidad
- Niveles de endotoxina ≤ 0,01 EU/μg ADN
- Columnas cerradas para procesamiento por bomba o FPLC
- Sistema escalable para hasta 200 mg de ADN plasmídico
Purificación a gran escala de plásmidos para procesos con altos estándares regulatorios
En respuesta a los rápidos avances en terapia celular y génica, así como en producción de vacunas, la necesidad de ADN plasmídico de primera calidad ha aumentado significativamente. Las aplicaciones emergentes, como las vacunas basadas en ARNm y los tratamientos de terapia génica, dependen en gran medida de un ADN plasmídico superior como material de partida fundamental. Uno de los aspectos más desafiantes de estas aplicaciones es lidiar con las endotoxinas – componentes de las paredes celulares de las bacterias gramnegativas. Aquí es donde entra en juego NucleoBond RS de MACHEREY-NAGEL. Al emplear el flujo de trabajo NucleoBond RS, puede lograr niveles de endotoxina ≤ 0,01 EU/μg ADN, garantizando el cumplimiento de estrictos estándares regulatorios. Las columnas NucleoBond RS están diseñadas para el aislamiento a gran escala de ADN plasmídico de grado vacunal a partir de cultivos bacterianos, utilizando bombas peristálticas o sistemas FPLC que cumplen con los más altos requisitos de calidad.
Especificaciones de ADN plasmídico
| Parámetro | Método | Criterio |
| Integridad | AGE / Fragment Analyzer | ≥ 90 % forma superenrollada |
| Pureza | Espectro UV | A260 / A280 1.8 - 2.0 A260 / A230 1.9 - 2.3 |
| Niveles de endotoxina | LAL / rFC | ≤ 0.01 EU/μg ADN |
| ADN hospedero | gPCR | ≤ 1 % |
| ARN hospedero | AGE Cuantificación Fluorométrica | No visible a 200 ng ADN ≤ 2 % |
| Proteína hospedera | BCA | ≤ 1 % |
Datos de aplicación – Purificación a gran escala de ADN plasmídico
El flujo de trabajo de purificación NucleoBond RS permite una escalabilidad sencilla de su purificación de plásmidos.
ADN de plásmidos fue purificado de *E. coli* con los cuatro tamaños diferentes de nuestras columnas NucleoBond RS. La figura muestra las cantidades máximas de ADN de plásmidos obtenidas por tamaño de columna.
Plásmidos aislados con columnas NucleoBond RS muestran una integridad estructural muy alta
La forma superenrollada de ADN plasmídico se considera la forma deseable para aplicaciones como la terapia génica o el desarrollo de vacunas. Las normas reglamentarias especifican que los plásmidos deben estar presentes con más del 90 % en forma superenrollada. Estos datos muestran que los plásmidos aislados con nuestras columnas NucleoBond RS cumplen con estos estándares.
ADN plasmídico de grado vacunal con más del 90 % en forma superenrollada
Datos técnicos de aislamientos plasmídicos utilizando nuestras columnas NucleoBond RS muestran niveles de endotoxinas ≤ 0.01 EU/μg ADN, ratios de pureza A260/A280 entre 1.8 – 2.0, y porcentajes de forma superenrollada (ccc) ≥ 90 %.
| NucleoBond RS 10 | NucleoBond RS 50 | NucleoBond RS 100 | NucleoBond RS 200 | |
| Endotoxinas (EU/μg ADN) | 0.009 ± 0.004 | 0.007 ± 0.006 | 0.003 ± 0.002 | 0.003 ± 0.003 |
| A260 / A280 | 1.99 ± 0.04 | 1.97 ± 0.02 | 1.97 ± 0.04 | 1.98 ± 0.01 |
| Forma superenrollada (ccc) en % | 92.3 ± 3.0 | 93.8 ± 2.1 | 93.0 ± 3.1 | 95.2 ± 2.1 |
Características del producto NucleoBond RS de un vistazo
- ADN plasmídico de grado vacunal con niveles de endotoxinas ≤ 0.01 EU/μg ADN
- Sistema escalable para hasta 200 mg
- Compatible con bombas peristálticas o sistemas FPLC, como ÄKTA™
- Configuración flexible de componentes
- Plásmidos de alta calidad como material de partida para aplicaciones, como producción de lentivirus/AAV o IVT-RNA (p. ej. ARNm)
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¡Compatible con sistemas ÄKTATM!
Información de pedido
Para garantizar la máxima flexibilidad para nuestros clientes, ofrecemos todos los componentes necesarios para la con nuestras columnas NucleoBond RS como productos independientes. Para obtener información más detallada sobre el equipo y las cantidades de los componentes individuales requeridos por preparación, consulte el manual de usuario.
Columnas
Columns
Contenido 5 Preps
Contenido 1 Preps
Contenido 1 Preps
Contenido 1 Preps
Tampóns
Buffers
Contenido 1000 mL
Accesorios
Accessories
Contenido 50 Preps
Contenido 50 Preps
