NucleoSpin Gel and PCR Clean-up, Mini kit extracción de gel y purificación PCR
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NucleoSpin Gel and PCR Clean-up es un kit basado en una columna de centrifugación que proporciona una solución 2 en 1 para la purificación de ácidos nucleicos a partir de geles y mezclas de PCR. Se ha diseñado teniendo en cuenta una serie de contaminantes y volúmenes diferentes para garantizar una recuperación y pureza óptimas para cada muestra individual.
| Aplicación | Purificación de PCR y extracción de gel |
|---|---|
| Aplicación secundaria típica | Análisis de restricción, Clonación, PCR, Secuenciación |
| Cantidad de muestras | < 200 µL de mezcla de reacción PCR, < 200 mg de gel de agarosa |
| Capacidad de enlace teórica | 25 µg |
| Certificación CE | No, sólo para uso científico |
| Formato | Mini preparación |
| Manejo | Centrifugación, vacío |
| Marca | NucleoSpin |
| Material de la muestra | Gel de agarosa, Mezcla de reacción PCR |
| Objetivo | Limpieza |
| Pureza típica A260/A280 | 1,8−1,9 |
| Recuperación típica | 70−95 % |
| Sustancias peligrosas | Sí |
| Tamaño de fragmento | < 25 kbp |
| Tecnología | Tecnología de membrana de sílice |
| Temperatura de almacenamiento | 15-25 °C |
| Tiempo de preparación | 10 min/6 preparaciones |
| Unidad de venta | 10 preparación(es), 50 preparación(es), 250 prep(s) |
| Uso automatizado | No |
| Vida útil (desde la producción) | 27 Mes(es) |
| Volumen de elución | 15-30 µL |
Limpieza de PCR 2 en 1 y extracción en gel (Mini y XS)
Ya sea para digestión con restricción, ligación y transformación, PCR o secuenciación, todas esas aplicaciones necesitan ADN de entrada limpio y de buena calidad. Aunque la limpieza de PCR y la extracción en gel son de las aplicaciones más comunes en automatización de laboratorios, a menudo son las aplicaciones supuestamente sencillas como la limpieza de PCR y la extracción en gel las que pueden suponer un desafío y determinar el éxito de un proyecto de investigación.
Vea nuestro video de flujo de trabajo de NucleoSpin Gel y PCR Clean-up (XS) para ver cómo obtener lo mejor de su procedimiento de PCR y extracción en gel:
Las siguientes puntas de pipeta podrían ayudarle a maximizar sus rendimientos y la calidad del ADN:
Minimizar la exposición a la luz UV
La exposición prolongada puede dañar su ADN. Así que intente cortar sus bandas lo más rápido posible.
Asegúrese de pesar realmente la lámina de gel
El peso de una lámina de gel se subestima fácilmente. Hasta 200 mg de gel de agarosa se pueden disolver con 400 µl de tampón NTI y cargarse en las columnas NucleoSpin Gel y PCR. Asegúrese también de fundir completamente su agarosa antes de aplicar la preparación de muestras a la columna. El exceso de agarosa sin fundir puede interferir con el procedimiento de extracción.
Optimice la elución para obtener el máximo rendimiento
Reaplique el eluido una segunda vez a la columna NucleoSpin Gel y de limpieza de PCR. Esto ayudará a aumentar el rendimiento mientras se mantiene bajo el volumen del de elución. Múltiples rondas de elución pueden aumentar significativamente los . Calentar el de elución a 70 °C e incubar el de elución en la columna a 70 °C durante 5 minutos también ayudará a aumentar el rendimiento. Si planea eluir en un volumen muy pequeño, asegúrese de utilizar nuestras columnas NucleoSpin Gel y de limpieza de PCR XS, optimizadas para volúmenes de elución inferiores a 10 µl. La columna recientemente desarrollada es la mejor herramienta para la concentración rápida de .
El pH importa: utilice tampón de elución y no agua para la elución
Utilice un tampón de elución ligeramente alcalino, como tampón de elución NE para un rendimiento óptimo. El agua suele ser ácida y la elución funcionará de manera más eficiente en un entorno ligeramente alcalino.
No omita el paso de secado
El paso de secado es realmente importante para garantizar la eliminación eficiente del etanol residual. El etanol es una sustancia inhibidora bien conocida de la PCR y puede causar problemas en muchas aplicaciones posteriores.
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