NucleoSnap ADNcf
- Nuevo diseño de columna (columna con sistema de corte) para el procesamiento rápido de grandes volúmenes de muestra
- No es necesario portador de ARN
- Protocolo optimizado para ADNcf libre de células BCT ('Tubos Streck')
Procedimiento Nucleo Snap ADNcf
El kit NucleoSnap ADNcf está diseñado para el aislamiento eficiente de ADNcf circulante de plasma sanguíneo humano o orina. El ADN fragmentado tan pequeño como 50–1000 pb se purifica con alta eficiencia. El diseño especial con sistema de corte de las Columnas NucleoSnap ADNcf permite un procesamiento práctico de hasta 5 mL de muestra a la vez (o 10 mL de muestra, que requiere tampón extra; ver información de pedido) junto con volúmenes de elución finales muy pequeños (20–50 μL), lo que resulta en ADN altamente concentrado.
Principio NucleoSnap (columnas de corte)
- Tres pasos sencillos
- Procedimiento rápido
- Procesamiento al vacío (p. ej., utilizando NucleoVac 24 Vacuum Manifold)
Aislamiento eficiente de ADNcf de plasma humano con EDTA de 5 mL
Aislamiento de ADN cf de plasma con EDTA con el kit NucleoSnap cfDNA y un kit basado en procesamiento al vacío de un competidor (Competidor Q). Los rendimientos de ADN se cuantificaron mediante qPCR (Kit de cuantificación de ADN humano Quantifiler, ThermoFisher Scientific en un Sistema de PCR en tiempo real Applied Biosystems 7500, ThermoFisher Scientific).
Procedimiento que ahorra tiempo
El ADN fragmentado puede aislarse de 12 muestras preservadas con EDTA con el kit NucleoSnap ADN fragmentado en menos de 50 min. mientras que el procedimiento de la competencia Q toma más de 80 min.
Protocolo optimizado para aislamiento de adn de ADN libre de células BCT (Streck)
ADN cf se aisló de tres muestras de BCT sin células, preservadas, con el kit NucleoSnap ADN cf (MN) y un kit de procesamiento al vacío de un competidor (Q). El ADN cf aislado muestra el pico típico a aprox. 170 pb, indicado por una flecha (->). El ADN cf se separó en un Bioanalyzer 2100 con un kit de ADN de alta sensibilidad (Agilent).
publicaciones seleccionadas
1. Prouteau et al., 2021 Nature Scientific Reports 11, Atricle number 877 (2021), El ADN tumoral circulante es detectable en histiosarcoma canino, melanoma maligno oral y linfoma multicéntrico.
2. Neuberger et al., 2021 Nature Scientific Reports 11, Article Number 13581(2021), Validación de ensayos de PCR cuantitativa para la detección de ADNcf sin extracción de ADN en pacientes con SLE en ejercicio.
3. Menschikowski et al., 2018, Oncotarget. 2018 Nov 16; 9(90): 36137–36150, Identificación de niveles raros de fragmentos de ADN tumoral metilado utilizando una PCR de gotas digitales de preamplificación con sesgo optimizado (OBBPA-ddPCR).