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NucleoProtect VET

Estabilización de ADN / ARN e inactivación de muestras para pruebas de biología molecular

La toma de muestras práctica, la inactivación de virus infecciosos, el almacenamiento y el envío, todo se simplifica con la solución de estabilización e inactivación NucleoProtect VET. Los resultados moleculares no se verán afectados, independientemente de si sus muestras veterinarias se envían en frío o a temperatura ambiente, requieren varios días para el envío o se congelan para almacenamiento a largo plazo. La estabilización de sus muestras significa aportar mayor precisión y menor varianza a sus resultados. El diseño intuitivo, que incluye códigos de barras pelables, permite una toma de muestras fácil en granjas o en la naturaleza.

Muestreo seguro y fácil

Los productos NucleoProtect VET son sistemas intuitivos de almacenamiento y transporte de un solo paso para la recolección de hisopos o muestras de sangre. 

Resultados de pruebas fiables

El reactivo elimina la virulencia al tiempo que preserva de forma fiable los ácidos nucleicos en la muestra. La estabilización de muestras aumenta la precisión y exactitud de las pruebas de biología molecular, reduce la variabilidad y lleva la estandarización y comparabilidad entre laboratorios a un nuevo nivel. 

Simplificando la logística

El estabilizador de ácidos nucleicos hace obsoleta la cadena de frío y permite el envío y almacenamiento a temperaturas ambiente. 

Protección del usuario

La inactivación eficaz de los virus infecciosos reduce el riesgo de infecciones adquiridas en el laboratorio y la propagación de enfermedades.

Ahorro de tiempo

Las muestras de NucleoProtect VET se pueden transferir directamente a los procedimientos de extracción de ácidos nucleicos preanalíticos, lo que agiliza las pruebas de diagnóstico y las rutinas de laboratorio

Trazabilidad segura

Tanto los tubos de hisopos como los de sangre vienen con etiquetas de doble código de barras con una sección de despegue para el seguimiento y la gestión definitivos de las muestras (incluido texto legible por humanos).

Principio del método

NucleoProtect VET consiste en una fórmula novedosa y no peligrosa, de propiedad exclusiva, que destruye las envolturas virales y desnaturaliza las proteínas del capósido, eliminando la virulencia de las muestras de hisopos o sangre, al tiempo que mantiene la integridad de los ácidos nucleicos. La inactivación se produce en 30 minutos a temperatura ambiente (15-25°C). No se requiere ningún procesamiento adicional de la muestra antes de la extracción de ácidos nucleicos.

Formatos de muestreo

El reactivo NucleoProtect VET está disponible en tres formatos de muestreo diferentes:

NucleoProtect VET Blood Tube

Formato
Tubo de recolección de sangre precargado con 4,0 mL de reactivo NucleoProtect VET
Material de muestra
1,6 mL de sangre entera animal (ruminantes, cerdos, aves de corral, equinos, animales de compañía,...)
Unidad de embalaje
Caja de 50 tubos
Diámetro del tubo
⌀ 13 mm
Formato de código de barras
Código de barras doble con sección de despegue, Código 128 con texto legible para humanos integrado para la identificación definitiva de la muestra y la gestión simplificada de la muestra
Cánulas
Compatible con diferentes tamaños de cánulas Luer estándar (cánulas no incluidas)
Número de referencia
REF 740755
NucleoProtect VET Swab Tube

Formato
Tubo de recolección con hisopo y tapa roscada, prellenado con 1.5 mL de reactivo NucleoProtect® VET
Material de muestra
Muestras de hisopo animal, como hisopos orales, faríngeos, nasales o de la garganta
Unidad de empaque
Caja de 50 tubos, incluyendo 50 hisopos con flecos estériles, empaquetados individualmente
Diámetro del tubo
⌀ 13 mm
Formato de código de barras
Código de barras doble con sección de desprendimiento, Código 128 con texto legible para humanos integrado para la identificación definitiva de la muestra y la gestión simplificada de la muestra
Cánulas
Hisopo con flecos de 150 mm (punto de rotura predeterminado a 80 mm)
Número de referencia
REF 740760
NucleoProtect VET Reagent

Formato
Reagente para la inactivación y estabilización de ADN / ARN en muestras veterinarias
Material de muestra
Muestras de sangre total o hisopos de animales
Unidad de embalaje
Solución a granel del reactivo NucleoProtect VET para el llenado de recipientes de transporte o almacenamiento

Características de manejo

Seguimiento de muestras mediante código de barras

Seguimiento seguro de muestras mediante etiquetas de doble código de barras con sección de pelado. La parte de pelado es autoadhesiva y puede ser transferida a formularios de solicitud de muestras. Código de barras: Código 128 con texto legible incrustado.

Extracción sencilla con hisopos

El portahisopos integrado, diseñado para facilitar la sujeción del mango del hisopo, permite una recogida sencilla y segura de la muestra en el campo y un procesamiento eficiente de la muestra en el laboratorio. El hisopo se puede extraer fácilmente de la muestra desenroscando el tapón.

Muestreo sanguíneo sencillo

El diseño del producto permite la recolección suave de muestras de sangre animal según la técnica de aspiración; las muestras de sangre se mezclan inmediatamente y estabilizadas con el reactivo de inactivación prellenado NucleoProtect VET. Los tubos de recolección de sangre son compatibles con todas las cánulas Luer comunes.

Inactivación comprobada de virus de alto riesgo

El reactivo NucleoProtect VET inactiva > 99,99 % de virus animales patógenos, independientemente de la matriz de fondo

Los virus infecciosos se inactivan inmediatamente en la solución NucleoProtect VET, lo que permite un manejo seguro tanto para veterinarios como para el personal de automatización de laboratorios. La capacidad de inactivación del reactivo NucleoProtect VET se ha demostrado para diversas matrices de fondo y virus que se sabe que tienen diferentes estructuras de la envoltura, así como susceptibilidades a los desinfectantes: FMDV (virus pequeño no envuelto), BTV-5 (virus grande no envuelto), LSDV (virus grande envuelto), PPRV y BCoV (virus envuelto). La tabla muestra el nivel de reducción del título viral según lo indicado mediante el ensayo de Dosis de Infección en Cultivo de Tejidos (TCID) (tiempo de incubación: 30 min). 

Estos datos se recopilaron en un proyecto de colaboración conjunta con el Friedrich-Loeffler-Institut, Instituto Federal de Investigación para la Salud Animal de Alemania.

Conservación fiable de ADN y ARN para pruebas de biología molecular

Se evaluó la capacidad de estabilización de NucleoProtect VET con todas las estructuras de genoma viral de origen natural, como ARNss, ARNdS y ADNs. Los ácidos nucleicos se conservan de forma fiable durante diferentes periodos de almacenamiento y condiciones, lo que hace innecesaria la logística de la cadena de frío y reduce el riesgo de degradación de muestras.

Datos de aplicación - Tubos de hisopos NucleoProtect VET

Los tubos NucleoProtect VET Swab aumentan la reproducibilidad y la precisión de las pruebas de diagnóstico molecular

 La saliva bovina se inoculó con virus de la enfermedad de la piel nodular (LSDV). Se sumergieron hisopos de espuma, hisopos de rayón e hisopos con revestimiento de fibra en la muestra de saliva durante 30 segundos cada uno (n= 4). De cada tipo de hisopo, dos se colocaron en tubos NucleoProtect Swab y dos en tubos con tapón roscado que contenían 1,5 mL de medio de cultivo celular. Los tubos se almacenaron a temperatura ambiente, 4 °C y 37 °C respectivamente durante el período de tiempo indicado (T0 = 2 h RT). Se extrajo ADN de LSDV en duplicado de cada tubo utilizando el kit NucleoMag VET y se analizó mediante qPCR. Los datos muestran 4 valores de Cq (puntos azules / grises) y el valor medio correspondiente (barra naranja). Los resultados muestran la estabilización del ADN de LSDV en los tubos NucleoProtect Swab en las diferentes condiciones de almacenamiento y la alta precisión de la detección de LSDV con diferentes tipos de hisopo. En contraste, la sensibilidad de la detección de LSDV en muestras de hisopo no estabilizadas disminuye claramente después del almacenamiento a temperatura ambiente o 37 °C, independientemente del tipo de hisopo. Los tubos NucleoProtect VET Swab se pueden utilizar con el hisopo incluido (hisopo con revestimiento de fibra) o con el hisopo de su elección. 

Estos datos se recopilaron en un proyecto de colaboración conjunta con el Instituto Friedrich-Loeffler, Instituto Federal de Investigación para la Salud Animal de Alemania.

Los experimentos in vivo muestran una mayor sensibilidad para las muestras de hisopos orales estabilizadas con NucleoProtect VET de ganado bovino positivo para FMDV

Se tomaron muestras de cinco bovinos positivos para el virus de la fiebre aftosa (FMDV) utilizando hisopos de rayón estándar. Las muestras de hisopo se incubaron posteriormente en 1,5 mL de solución de estabilización NucleoProtect VET o medio esencial mínimo durante 24 h a temperatura ambiente y luego se sometieron a purificación en duplicado utilizando el kit NucleoMag VET de MACHEREY‑NAGEL. El ARN de FMDV se detectó mediante qRT-PCR. Los datos muestran el valor medio de las muestras duplicadas y los valores máximo y mínimo. La comparación de los valores medios de Cq de las muestras de hisopo almacenadas en solución de estabilización de muestras NucleoProtect VET frente al medio esencial mínimo demuestra el aumento de la sensibilidad, ya que el FMDV se detecta entre 1,2 y 4,3 valores de Cq antes en la solución de estabilización NucleoProtect VET. Nota: Las muestras se recolectaron de bovinos individuales, lo que resultó en títulos virales y valores de Cq variables. Estos datos se recopilaron en un proyecto de colaboración conjunta con el Instituto Friedrich-Loeffler, Instituto Federal de Investigación para la Salud Animal de Alemania.

Datos de aplicación - Tubos para sangre NucleoProtect VET

Los tubos sanguíneos NucleoProtect VET preservan de forma fiable los ácidos nucleicos de varios virus patógenos independientemente de la concentración del título viral y la especie animal.

Se añadieron títulos bajos, medios y altos del virus de la rinitis atípica canina (ss(-)ARN), el enterovirus porcino (ss(+)ARN), el virus de la lengua azul (dsARN) o el virus de la vacuna (dsADN) a muestras de sangre bovina, caprina, ovina y porcina. Las muestras de sangre con virus añadido se recogieron en tubos sanguíneos NucleoProtect VET y se almacenaron según las condiciones de almacenamiento indicadas (T0 = 2 h a temperatura ambiente). Los ácidos nucleicos se extrajeron en triplicado por punto temporal de prueba utilizando el kit NucleoMag VET y posteriormente se analizaron mediante qPCR. Los datos muestran 12 valores de Cq para cada punto temporal de prueba (extracción en triplicado para cada uno de los cuatro tipos de sangre animal (puntos azules) y el valor medio resultante (barra naranja)). Los datos indican que los ácidos nucleicos se preservan de forma eficiente independientemente del tipo de sangre animal, la especie viral o el título viral. La varianza general de Cq es inferior a ± 1 Cq de media.

Los tubos sanguíneos NucleoProtect VET reducen la variabilidad y aumentan la fiabilidad de los resultados de las pruebas veterinarias.

Se añadieron títulos virales bajos y altos del virus de la lengua azul (BTV-8) a muestras de sangre bovina, ovina, caprina y porcina. Las muestras se recogieron con tubos sanguíneos NucleoProtect VET o como muestras de sangre con EDTA. Las muestras se enviaron a cuatro laboratorios independientes que extrajeron los ácidos nucleicos en un período de 2 a 7 días después de la recolección utilizando el kit NucleoMag VET de MACHEREY-NAGEL (la extracción se realizó en duplicado). Todos los elutados se analizaron en duplicado en un laboratorio utilizando un ensayo qRT-PCR con 45 ciclos. Los datos representan 16 valores de Cq resultantes (puntos azules) y el valor medio resultante (barra naranja). Los datos muestran que con los tubos de recolección de sangre con EDTA, la variación en los resultados analíticos puede ser muy grande, e incluso es posible obtener resultados falsos negativos y altas pérdidas de sensibilidad. En contraste, los datos para los tubos sanguíneos NucleoProtect VET muestran resultados altamente reproducibles y una varianza mínima, independientemente de la especie animal, las condiciones de envío y almacenamiento.

Estos datos se recopilaron en un proyecto de colaboración conjunta con el Instituto Friedrich-Loeffler, Instituto Federal de Investigación para la Salud Animal de Alemania.